Basta除草劑（10%草銨膦溶液）
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名稱(chēng)
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貨號(hào)
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規(guī)格
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Basta除草劑（10%草銨膦溶液）
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GF45520S
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100 ml
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● 貯存、運(yùn)輸及效期：
4℃貯存，常溫運(yùn)輸，有效期兩年。
● 產(chǎn)品介紹：
草銨膦，英文名稱(chēng)：glufosinate-ammonium；phosphinothricin；PPT。中文別名：DL-膦絲菌素，草丁膦。商品名：Basta；Buster。CAS號(hào)：77182-82-2，分子式：C5H15N2O4P，分子量：198.16。固體為白色結(jié)晶，有輕微氣味，熔點(diǎn)215℃，蒸氣壓<0.1 MPa(20℃)，在一般有機(jī)溶劑中溶解度低，對(duì)光穩(wěn)定。
谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase ，GS）在植物的氮代謝過(guò)程中一個(gè)重要的解毒酶，可解除由硝酸鹽還原、氨基酸降解及光呼吸中釋放出的銨的毒性。草銨膦的靶標(biāo)酶是谷氨酰胺合成酶（GS）。正常情況下，GS可以由ATP及glutamate形成λ-glutamyl
phosphate。但是在草銨膦處理后，草銨膦先與ATP結(jié)合，磷酸化的草銨膦占據(jù)GS分子的8個(gè)反應(yīng)中心，使GS的空間構(gòu)型發(fā)生變化，抑制GS活性。植物葉片內(nèi)的GS有2種形式，GS1存在細(xì)胞質(zhì)中，GS2存在葉綠體中，且在不同植物葉片內(nèi)，二者活性比例亦有所不同，但草銨膦能抑制GS所有已知的形式。草銨膦抑制GS的結(jié)果，可以導(dǎo)致植物體內(nèi)氮代謝紊亂，銨的過(guò)量積累，葉綠體解體，從而光合作用受到抑制，最終導(dǎo)致植物死亡。
草銨膦在土壤中的半衰期較長(zhǎng)，半衰期為12-70天，一般情況下為40天。資料顯示草銨膦在pH
5-9的緩沖液中的水解半衰期均大于400天，屬于難水解類(lèi)型。草銨膦在弱酸和弱堿條件下均能穩(wěn)定存在。溫度對(duì)于草銨膦水解的影響明顯，隨溫度升高，降解加快，半衰期大大縮短。從吸水鏈霉菌（Streptomyces hygroscopicus）克隆的bar基因（bialaphos resistance gene）被普遍用于轉(zhuǎn)基因作物的報(bào)告基因，該基因編碼膦絲菌素乙酰轉(zhuǎn)移酶（phosphinthricin acetyltransferase，PAT），提供對(duì)于除草劑（草銨膦和雙丙氨膦）的抗性。在培養(yǎng)基中添加20
mg/L（0.002%）以上的草銨膦，存活的組織可以被初步認(rèn)為含有bar基因。
10%Basta即為含量（w/v）10%的草銨膦溶液（0.5
M，100
mg/ml）。用于植物抗性篩選，用前使用去離子水稀釋?zhuān)Y選植株噴施一般工作濃度為0.001-0.002%（0.05
mM-0.1 mM）。
用于植物組織培養(yǎng)，請(qǐng)用0.22
μm濾膜過(guò)濾除菌后使用。
● 使用方法：
利用Basta篩選轉(zhuǎn)基因植物主要有兩種方法。一種是噴灑篩選：在幼苗長(zhǎng)出葉片之后直接向待篩選植株噴施Basta，另一種是平板篩選：在MS培養(yǎng)基中加入適當(dāng)濃度的
Basta。培養(yǎng)皿中央點(diǎn)野生型種子作為對(duì)照，其余部分點(diǎn)突變體種子，水平放置培養(yǎng)，挑選發(fā)芽較好的幼苗，移栽到土壤中作為候選突變體培養(yǎng)。不同的植物對(duì)于Basta的敏感程度不同，同一植物不同生長(zhǎng)階段對(duì)于Basta
的敏感程度也不同。臨界篩選濃度的判定標(biāo)準(zhǔn)：以野生型幾乎不能發(fā)芽或者發(fā)芽不能存活的basta濃度。
有文獻(xiàn)報(bào)道，以擬南芥為材料，土壤中幼苗篩選草銨膦終濃度為~120
mg/L；培養(yǎng)基中篩選草銨膦終濃度為20-50
mg/L；噴灑篩選草銨膦濃度為10-20
mg/L。參見(jiàn)下表：
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篩選試劑
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終濃度
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材料
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處理方式
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文獻(xiàn)
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草銨膦
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57.8 mg/L
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擬南芥幼苗
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噴灑篩選
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植物生理與分子生物學(xué)報(bào) 2005，31（5），499-506
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草銨膦
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10 mg/L
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擬南芥種子
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平板篩選
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Fronties
in Plant Science 2022，13，Article 829121
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草銨膦
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0.1 mg/L
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Gladiolus愈傷組織
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平板篩選
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In Vito
Cell Biol Plant 1997,33:180-183
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草銨膦
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2-4 mg/L
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Stevia甜葉菊
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平板篩選
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Scientific
Reports. 2020,10:16224
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草銨膦
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60 mg/L
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擬南芥幼苗
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噴灑篩選
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Cold
Spring Harb Protoc 2006. pdb.prot4670
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雙丙氨膦
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10 mg/L
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擬南芥幼苗
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平板篩選
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Plant
Biotechnology Published June10，2022
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雙丙氨膦
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1 mg/L
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Dllisgrass愈傷組織
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懸浮培養(yǎng)
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Grassland
Science 2002，47（6）：588-593
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雙丙氨膦
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0.01 mg/L
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Gladiolus愈傷組織
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平板篩選
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In Vito
Cell Biol Plant 1997,33:180-183
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